色譜填充柱是色譜分析中的重要部件，其測定步驟和使用注意事項對于保證分析結果的準確性和可靠性至關重要。
色譜填充柱的使用注意事項：
1.避免反沖
-一般情況下，色譜柱不能反沖，除非生產者明確指出可以這樣做。反沖會迅速降低柱效。
2.流動相的選擇與控制
-使用適宜的流動相，特別是要注意pH范圍，以避免固定相被破壞。例如，以硅膠為基質的填料只能在pH=2～9范圍內使用。
-有時可以在進樣器前面連接一預柱，使流動相在進入分析柱之前預先被“飽和”，從而保護分析柱不受損害。
3.定期清洗與保養
-經常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右。
-如果發現壓力升高或柱效下降，可能是由于燒結濾片被堵塞或柱頭被污染等原因造成的，應及時采取措施進行處理，如更換濾片或清洗柱頭等。
4.防止緩沖溶液殘留
-絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發干燥。
5.注意柱效變化
-新的色譜柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時可補加填料使柱效恢復。同時，如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大，需要小心處理。
6.采用保護柱
-在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5～30mm)，可以起到保護、延長柱壽命的作用。雖然采用保護柱會損失一定的柱效，但這通常是值得的。
7.操作規范
-在整個實驗過程中，應嚴格遵守操作規程，避免劇烈震動和碰撞色譜柱，以免影響其性能和壽命。
8.記錄與監控
-詳細記錄每次使用的參數(如流動相組成、流速、溫度等)以及觀察到的現象(如壓力變化、基線穩定性等)，以便及時發現問題并采取相應措施。
